问:目前尿素氮在临床检验中主要存在哪些问题?
答:主要有四个方面的问题:
试剂稳定性较差。
试剂中酶量不足,特别是NADH的不足。
存在方法学上的缺陷。
一些抗凝剂的不当使用也会导致检测结果的偏差。
问:尿素氮试剂的稳定性为什么较差,针对这个问题如何解决?
答:尿素氮试剂的稳定性差是由于试剂中NADH的不稳定造成的。NADH容易被氧化,造成吸光度下降,并且目前尚无好的方法能够使尿素氮试剂中的NADH保持稳定。这个问题可以用标准加以控制,在检测的过程中经常定标。
问:为什么在临床检验中尿素氮试剂的线性不好,造成BUN高值检测不出?
答:同上面的问题一样,原因都出在NADH的稳定性上。NADH被氧化后含量降低无法完成同BUN的偶联反应。
问:针对NADH含量低的问题,如何解决?
答:根据相关报道,有人建议在试剂中加入正常用量6倍的NADH。
问:BUN检测方法学上存在什么缺陷?
答:目前尿素氮的检测方法主要是脲酶-NADH偶联法,该方法学存在以下2个缺陷:其一,血清中的血氨含量增高的情况下,会同时消耗GLDH和NADH,使得检测结果不准确;其二,内源性的酶与指示酶GLDH竞争氧化NADH,从而降低了酶促偶联系统的准确性。
问:尿素氮检验方法学上的缺陷如何弥补?
答:目前尚无好的解决方法,但可以根据临床诊断结果来纠正参数,例如延长延迟时间等。
问:什么样的抗凝剂会造成检测偏差?
答:带氨的抗凝剂会消耗GLDH和NADH,造成检测结果的正偏差;而含有抑制脲酶活性成分的抗凝剂会造成检测结果的负偏差。